期刊简介

               本刊为中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库来源期刊、中国学术期刊综合评价数据库来源期刊,是全国各地广大医务工作者,特别是从事神经科临床和科学研究工作人员切磋技艺、交流学术经验和更新知识的园地。辟有论著与学术交流、短篇与病例报告、综述、专题讲座、专刊评价、临床药物治疗、会议(座谈)纪要、临床病理(病例)讨论、技术信息、新药新仪器、新书介绍及国内外学术动态等多个栏目。                

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  • 杂志名称:卒中与神经疾病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:武汉大学人民医院(湖北省人民医院)
  • 国际刊号:1007-0478
  • 国内刊号:42-1402/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:国家科学技术部中国科技论文统计源期刊期刊收录:维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
卒中与神经疾病杂志2008年第05期

流式细胞仪分选thy1-GFP-J转基因小鼠皮层及海马神经元

余樱;任庆国;解翠红;王伟

关键词:流式细胞仪, 荧光激活细胞分类术, thy1-GFP-J转基因小鼠, 神经元
摘要:目的 获得活体哺乳动物脑内单一纯化的神经元群.方法 用RT-PCR和激光共聚焦显微镜扫描脑片鉴定thy1-GFP-J转基因小鼠,取2月龄鉴定阳性小鼠皮层和海马组织.应用番木瓜蛋白酶分离系统制备脑组织单细胞悬液.PI标记死亡细胞,流式细胞仪荧光激活细胞分类技术(FACS)分选收集GFP+和PI的存活神经元,并抽提获得细胞的RNA和蛋白.结果 阳性转基因小鼠DNA的PCR扩增鉴定显示为内参(324bp)和所转基因(173bp)两条带,脑片的激光共聚焦扫描结果显示海马和皮层均可见大小较均一的圆点状绿色荧光.经FACS分选后的细胞几乎全都发出绿色荧光,每次产量约为0.5~1×106个存活神经元.获得的纯化神经元中抽提的RNA和蛋白可用于RT-PCR和western blot检测.结论 利用FACS可以从thy1-GFP-J转基因小鼠脑内获得单一纯化的存活神经元群.该技术的应用将为活体神经元细胞特异性的基因表达和蛋白定量分析研究提供一个可行方案.