期刊简介

               本刊为中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库来源期刊、中国学术期刊综合评价数据库来源期刊,是全国各地广大医务工作者,特别是从事神经科临床和科学研究工作人员切磋技艺、交流学术经验和更新知识的园地。辟有论著与学术交流、短篇与病例报告、综述、专题讲座、专刊评价、临床药物治疗、会议(座谈)纪要、临床病理(病例)讨论、技术信息、新药新仪器、新书介绍及国内外学术动态等多个栏目。                

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  • 杂志名称:卒中与神经疾病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:武汉大学人民医院(湖北省人民医院)
  • 国际刊号:1007-0478
  • 国内刊号:42-1402/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:国家科学技术部中国科技论文统计源期刊期刊收录:维普收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
卒中与神经疾病杂志2015年第05期

人 Smad 4基因在胶质瘤细胞中的作用研究

刘宝辉;田道锋;王军民;李明昌;董慧敏;张申起;蔡强;陈谦学

关键词:Smad4, U251 细胞, 质粒体, 细胞活性, 化疗敏感性
摘要:目的:构建人 Smad 4基因质粒体并检测其在胶质瘤细胞系 U251内的表达水平及作用。方法构建 PEGFP-Smad4质粒体,应用 FUGENE HD 转染质粒体进入 U251,G418筛选,挑出单克隆扩增,建立稳定细胞株 N1-U251和 Smad4-U251。将实验分为空白组(U251细胞)、N1组(空质粒-U251)、Smad4组(Smad4-U251),检测 Smad4基因和蛋白表达水平;使用 CCK8法检测空白组、N1组、Smad4组细胞活性。使用流式细胞术检测细胞凋亡率,使用免疫印迹技术检测 Caspase 3与 p-Histone H3蛋白表达水平。结果PEGFP-Smad4质粒体构建成功,N1-U251,Smad4-U251稳定细胞株构建成功,CCK8显示空白组、N1组、Smad4组细胞活性分别是1±0.03、0.95±0.04、3.22±0.13,Smad4组与 N1组比较,差异明显(P <0.05),免疫印迹显示高表达 Smad 4组 pHistoneH 3表达水平明显增高;空白组、N1组、Smad 4组在经替莫唑胺化疗处理后细胞凋亡率分别为0.36±0.09、0.38±0.11、0.21±0.03,Smad 4组与 N1组比较,差异明显(P <0.05);免疫印迹显示高表达 Smad 4组 Caspase 3表达水平明显降低。结论成功构建人 Smad4质粒体并建立高表达 Smad4的细胞系,高表达 Smad4可以提高 U251细胞活性,降低化疗敏感性。